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吐溫20在WB中的作用是什么？
發布時間： 2024-03-20 點擊次數： 4468次Western blot 實驗中常用的洗液 TBST 是一種實驗室配制液體，其配方大體相似，其中一種組成成分是 Tween-20，它是一種黃色或琥珀色的透明油狀液體，有特殊的氣味和輕微的苦味。使用移液器吸取時會感覺到一種滯后感。
Tween-20 ，也稱Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名為吐溫-20或吐溫20。為非離子型表面活性劑，大白話就是：它的作用就是洗掉非特異性結合的蛋白質。其在 Western blot 實驗里的作用原理如下：它可以通過降低溶液表面張力，使抗體更容易擴散并結合到膜上的目標蛋白，同時減少非特異性結合，從而提高檢測的特異性和信噪比。
在WB洗液里的吐溫是和BSA一樣，對抗原抗體蛋白提供保護作用，同時因為是表面活性劑（司盤加成親水的環氧乙烷基團后的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用于洗脫未結合的抗體、減少非特異性結合。 如果抗體濃度過高或封閉不充分導致背景過高，可以通過降低抗體稀釋度、增加洗膜次數和Buffer用量，或在Wash Buffer中添加終濃度0.05%的Tween-20來改善。 雖然 WB 是一類基礎實驗，但是基礎并不代表簡單。翻車的主要原因在于 WB 的步驟實在繁瑣：從配置蛋白膠開始，到蛋白電泳、蛋白轉膜、抗體孵育，一整套流程下來花費 1～2 天的時間才能進行最后的顯影。這些環節中但凡有一個出錯，就會導致實驗的失敗。
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