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Biozellen類器官3D培養基質膠套裝
Biozellen®基質膠特點
1、100%植物源材料，無任何動物成分；
2、胺基酸序列100%人源化 ；
3、可調控基質膠硬度進行多種細胞培養；
4、3D細胞/類器官培養種類數量范圍更廣；
5、無人畜共通病原菌或毒素風險；
6、較為適用于醫療級生物原料；
7、高活性、高純度、可融化；
8、3D培養結束后基質膠可以溫和融化，并保留3D細胞/類器官結構完整性。
Biozellen類器官3D培養基質膠套裝
Catalog No. B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
Specification 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit
Storage -20℃運輸， 1 年保存
一、產品描述
Biozellen®3D 類器官培養基質膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑，可進行 3D 類器官培養與微環境等相 關實驗應用； 本試劑盒操作便利且可調控膠體硬度進行多種類器官培養測試；高分子膠體可快速形成水凝 膠， 建議操作此培養膠體前詳讀此使用指南。 （Biozellen®3D 類器官培養基質膠材料為植物來源，無動物成分）
二、應用
• 3D 類器官培養。
• 適合用于 3D 類器官藥物篩檢平臺
三、適用細胞種類
• 原代細胞
• 干細胞
四、試劑盒組分
五、使用步驟：
A.試劑制備
A 基質膠：將 A 基質膠溶于 37℃水浴槽回溫 10 分鐘， 確認*融解. C 緩沖溶液(1X)制備：使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養液(例如： 無血清 DMEM、opt-MEM) 制 備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) . D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
B.Biozellen®3D 類器官培養基質膠的制備
全部步驟需要在無菌環境內操作，操作步驟如下：
1. 將 24 孔培養板放置于冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合，并與 0.5 毫升 37℃ A 膠按照 1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度 105~107cells/mL。 注：請選擇適當的培養溶液與條件進行試驗，貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上，膠體將于 5 分鐘內成膠。 注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。
4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的 1X C 緩沖溶液，并蓋過步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待 15 分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養基溶液。
6 將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養箱內進行 7~14 天的培養，并觀察細胞球體的形成，按正常培養基 更換頻率進行更換操作。
C.溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養基吸取移除，并用 1X PBS 進行清洗。 小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過膠滴于室溫反應 5 分鐘。 溫和的用 1 毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。 將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用 1000 rpm 的轉速離心 10 分鐘，移除上清液體并收集細胞 球體做分析。
D.收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作
1. 添加 trypsin-EDTA 并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。
2. 用 1 毫升移液管混合，直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉的轉速進行離心 10 分鐘，并移除上清 液體收集沉淀的單細胞做分析。
六、案例分享
A.形成 3D 腫瘤球體成功案例分享
B.Biozellen 基質膠被溶解后分離的完整 3D 細胞結構照片
培養后的 3D 細胞球體， 在 Biozellen 基質膠被試劑盒里面的 D Buffer 溶解分離后仍然可以得到完整的 3D 細胞結構
僅供研究使用
深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D培養基質膠大量現貨，經驗證可*替代BD/康寧的基質膠，來源為植物源且氨基酸序列100%人源化，無人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服務和技術支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經理聯系尋求幫助。
