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    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

    發布時間: 2025-01-22  點擊次數: 919次

    FastPure® EndoFree Plasmid Maxi Kit

    質粒大提試劑盒 (DC202)

    內毒素含量極低,后續可做轉染級別實驗

    產量高,高拷貝質粒產量達到 0.2 mg-1.5 mg

    操作簡便

    保存條件 : 試劑盒除 RNase A 和內毒素清除劑外,其他組分室溫保存;RNase A 保存于 -30℃ ~-15℃ ;  內毒素清除劑 2℃ -8℃可以保存一個月,長期保存放 -30℃ ~-15℃ ▲ 若低溫保存,溶液容易產生沉淀。在使用前務必將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時間,必要時可在 37℃水浴鍋中預熱 10 min,溶解沉淀,混勻后再使用。


    產品概述

    本試劑盒適用于提取 150 ml-300 ml 過夜培養的菌液,采用改進的 SDS- 堿裂解法裂解細胞,粗提物通過內毒素清除劑選擇性結合離心去除內毒素,然后離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低 pH 值狀態下選擇性地結合溶液中的質粒 DNA,再通過漂洗液將雜質和其它細菌成分去 除,最后用低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈質粒 DNA 從硅基質膜上洗脫。離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界著名公司特制吸附膜, 柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好,克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。不需要使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀, 可快速提取 0.2 mg-1.5 mg 純凈的高拷貝質粒 DNA,提取率達 80-90%。工藝配方清除內毒素,內毒素含量極低(<0.1 EU/μg DNA), 細胞轉染效果非常好。也可直接用于酶切、PCR、體外轉錄、轉化、測序等各種分子生物學實驗。


    性能展示

    產量高

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

    用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 試劑盒提取大小為 3.0 kb、 5.0 kb、5.9 kb、21.5kb 不同大小的質粒,1% 瓊脂糖膠電泳檢測, M:DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)。結果顯示本試劑盒 針對不同大小的質粒均具有較好的提取效果,產量高。


    純度高

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)
    使 用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 提取的 M3K 的質粒 進行酶切驗證,1% 瓊脂糖膠電泳檢測,M:DL5000 DNA Marker  (Vazyme #MD102)。結果顯示提取的質粒純度高,對下游酶切反 應無抑制作用。


    操作流程概要

    適用范圍

    本產品適用 150 - 300 ml 過夜培養的菌液,大規模提取質粒。


    組分

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

    RNase A10 mg/ml,用于去除 RNA; Buffer P1:細菌懸浮液,第一次使用前請將 RNase A 加入到 Buffer P1 中; Buffer P2:細菌裂解液(含 SDS/NaOH); Buffer P4:中和液; 內毒素清除劑:可以有效去除質粒粗提液中的內毒素; Buffer PW:洗滌液,第一次使用前請按說明加一定體積的乙醇; Buffer TB:洗脫緩沖液; FastPure DNA Maxi Columns:質粒 DNA 吸附柱; Collection Tube 50 ml:濾液收集管。


    自備材料

    無水乙醇,異丙醇,50ml高速離心管

    Buffer PW 需在使用前添加一定量的無水乙醇


    提取流程

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)


    FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit

    高產無內毒,25 min 轉染級質粒小提 (DC203)

    產量高 提取效率高,質粒 DNA 產量高達 50 µg
    內毒素殘留量 內毒素殘留量 ≤0.1 EU/µg,下游可做轉染級別實驗

    快速 無需冷熱交替,25 min 內即可完成提取


    產品概述
    本試劑盒適用于1 - 5 ml過夜培養的菌液,采用優化的堿裂解法裂解細胞,通過硅膠膜吸附技術與特殊的溶液,可特異性結合質粒并有效地去除內毒素、蛋白等雜質,整個提取過程僅需 25 min。提取的質粒 DNA 內毒素殘留低 (≤0.1 EU/μg),可用于多種細胞的轉染及常規的分子實驗。


    性能展示(產量高)
    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

    分別使用 Vazyme #DC203( 簡稱 V) 與市售競品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質 粒,對提取產物進行濃度測定 ( 圖 1A、B) 及跑膠檢測 ( 圖 1C、D)。結果表明,Vazyme #DC203 提取的質粒產量高、完整性好。

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

    分別使用 Vazyme #DC203( 簡稱 V) 與市售競品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質粒, 對提取的產物進行內毒素殘留量的測定 ( 圖 2A、B)。結果表明,Vazyme #DC203 提取的質粒內毒素殘留量低,且優于競品。

    提取純化產品冊---06 柱式DNA提取產品(DC202、DC203)

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