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WB實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟及用到的相關(guān)試劑匯總

發(fā)布時(shí)間： 2024-06-17　　點(diǎn)擊次數(shù)： 2182次

以下是 WB 實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)步驟及相關(guān)試劑耗材匯總：

一、實(shí)驗(yàn)步驟

1. 蛋白提取：使用適當(dāng)?shù)牧呀庖禾崛〉鞍住?br style="margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; color: rgba(0, 0, 0, 0.9); font-family: system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, " helvetica="" pingfang="" hiragino="" sans="" microsoft="" yahei="" font-size:="" letter-spacing:="" text-align:="" white-space:="" background-color:="" box-sizing:="" border-box="" overflow-wrap:="" break-word=""/>2. 蛋白定量：采用 Bradford 法或 BCA 法等測(cè)定蛋白濃度。
3. SDS-PAGE 電泳：配制分離膠和濃縮膠，上樣進(jìn)行電泳。
4. 轉(zhuǎn)膜：將蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移到 PVDF 或 NC 膜上。
5. 封閉：用封閉液封閉膜。
6. 一抗孵育：加入一抗，室溫或 4℃孵育。
7. 洗滌：用洗滌液多次洗滌膜。
8. 二抗孵育：加入相應(yīng)的二抗，孵育后洗滌。
9. 顯色：使用化學(xué)發(fā)光試劑顯色，曝光并成像。

二、試劑耗材

1. 試劑：裂解液、PBS、蛋白上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉(zhuǎn)膜緩沖液、封閉液、一抗、二抗、化學(xué)發(fā)光試劑等。
2. 耗材：移液器及槍頭、離心管、培養(yǎng)皿、電泳槽、轉(zhuǎn)膜裝置、PVDF 膜或 NC 膜等。

需要注意的是，具體的實(shí)驗(yàn)步驟和試劑耗材可能因?qū)嶒?yàn)條件和要求的不同而有所差異。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

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