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平滑肌細胞的分離和培養(yǎng)
發(fā)布時間： 2022-12-09 點擊次數(shù)： 2024次料與儀器
0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液
平滑肌培養(yǎng)液
Petri培養(yǎng)皿 手術刀和10號手術刀片 解剖剪 組織鑷步驟
1. 從小牛取胸主動脈。
2. 將胸主動脈浸入 Hanks 液。
3. 分離細胞之前將動脈放在冰上。
4. 將動脈放入 150 mm × 25 mm Petri 培養(yǎng)皿。
5. 用解剖剪沿長軸剪開動脈。
6. 用手術刀片輕刮動脈內腔面，以除去內皮細胞。
7. 將動脈的中膜與內膜和外膜分離。
8. 將中膜切成約 1 cm2 大小的組織塊。
9. 將中膜組織塊放入 60 mm × 15 mm Petri 培養(yǎng)皿，內膜側朝下。
10. 讓組織塊貼壁約 10 min。
11. 直接在組織塊上注 1 ml SMCM（平滑肌培養(yǎng)液（smooth muscle cell medium，SMCM）：DMEM 添加 20 % FBS，100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 鏈霉素）。
12. 將組織塊放入濕潤的培養(yǎng)箱，在 37°C 和 10% CO2 條件下孵育。
13. 第 2 天加入 5 ml SMCM，注意勿讓組織塊去附著。
14. 將組織塊繼續(xù)孵育 10 d。此后，平滑肌細胞從組織塊遷移出來，并變?yōu)閱螌印?br style="border: 0px solid currentcolor; box-sizing: border-box; --tw-shadow:0 0 #0000; max-width: 100%; background: none !important; font-size: 0.32rem !important; line-height: 0.48rem !important; margin: 0px !important;"/>
15. 細胞生長接近形成單層時，用 0.25 % 胰蛋白酶和 EDTA 混合液傳代。以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規(guī)模生物生產、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產，包括培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質膠產品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質的產品和技術服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)
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