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細胞轉染率低，轉染試劑要全背鍋嗎？
發布時間： 2021-09-24 點擊次數： 1889次目前細胞轉染技術主要分為三大類：化學法、物理法及生物學法。但是沒有一種方法是通用并且準確無誤的，所以只有依據自己的實驗要求或者實驗探索選擇理想的方法，才能獲得漂亮的實驗結果。當然也可以在前輩們發的文獻中多看看，前車之鑒可以減少很多不必要的花費。
細胞轉染低都是轉染試劑的問題嗎？純度不夠確實會有這樣的問題，所以選擇轉染試劑很重要，其次還需要考慮以下幾點影響：
1. 其他微生物污染
您覺得您養的細胞 ，不，不，不 ，可能您只知道您養的是細胞，你不知道的是您的細胞可能背著您養了一群小三，比如支原體，病毒，黑膠蟲等等，特別是支原體它可以更改細胞的特性，穿透細胞膜進行基因改造，培養幾代可能看不到“它"給細胞做的整容效果，但是隨著代次的增多，細胞就慢慢體現出來了，“它"已經變得不是從前的那個“它"了，所以建議在轉染之前進行一次支原體檢測，如有支原體清除干凈再轉染。
2.交叉污染：
如果同時養了很多細胞，在操作的時候沒有規范化，然后不小心讓A細胞到B細胞家里走了個親戚，最后的結果可能就是A細胞和B細胞不離不棄，若B細胞比較強悍，可能會發生鳩占鵲巢的事情。所以操作的時候一定要注意，發生不明確的交叉污染，寧可錯殺一千，不要放過一個。
3.轉染高不高，時機很重要
轉染細胞真的沒有那么容易 ，想什么時候都可以，就像不尿急，占個廁所也拉不出來，相比非分裂的細胞—正在分裂的細胞往往會比靜止細胞更容易攝取并表達外源DNA，因此對大多數操作而言，細胞一般建議在轉染當天或者前一天種板，需要注意的是，鋪板細胞不宜過多，特別是瘋長的癌細胞，因為如果細胞較多，甚至互相疊加，細胞自己都吃不飽，住不好，它也糟心的很，哪有時間和您玩轉染？
4. 抗生素和血清帶偏的轉染效果
本來想 ，能讓個細胞好好生長不容易 ，為了防治心里覺得細胞可能產生的各種污染 ，于是給他們加上各種抗生素預防，比如青霉素和鏈霉素，在細胞轉染的時候，若含有這兩個組分，可增加細胞的通透性，導致轉染過低或者細胞全死亡，所以細胞它是不會說話 ，要是會說話，肯定要罵我們了 ，好好的為啥一直給他們吃各種的藥。有些轉染技術如脂質體轉染在有血清存在的情況下效率會很低，因此轉染前要去除血清。
5. 另外DNA不純，攜親戚上陣或內毒素超標，都會引起轉染效果偏低或者細胞死亡現象的發生，還是回到開頭的那句話，選擇合適的試劑，多參考前輩們的意見。
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