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詳解miRNA的誕生之旅
發布時間： 2021-09-01 點擊次數： 3407次miRNA 是由內源性發卡結構轉錄產物衍生而來的一種長為 19-25nt 左右的單鏈 RNA。
第一， miRNA基因最先被RNA polymerase II轉錄生成5'蓋帽和3‘加尾的初級轉錄體，稱為pri-miRNA，長度約為 300-1000bp。
第二，經 RNase III enzyme Drosha 和 DGCR8 剪切生成由 70 個核苷酸組成的不*的發卡結構，并且在 3‘端末端具有 2 個核苷的懸垂，此末端則為成熟的 miRNA 的末端，上面有一些凸起和環狀結構，稱為 pre-miRNA。DGCR8 是屬于 Pasha 蛋白家族的。該莖環結構可以在 miRBase 數據庫中查詢到。
第三，該莖環結構的前體 miRNA 被核內轉運蛋白 Exportin5 捕獲到，并且通過細胞核孔復合體被運輸到細胞外。
第四，運輸到細胞外的 pre-miRNA 很快被 Dicer 酶與 GTP 酶 Ran 和 TRBP 等組成的復合物識別，并且開始消化該 pre-miRNA，切掉其環狀結構，直至其變成不穩定的雙鏈 RNA，也稱為 dsRNA 或者是 miRNA/miRNA*。
第五，dsRNA 的不穩定可以被 AGO 蛋白以及 RNA 解旋酶復合物解鏈成為兩個單鏈，并且其 中一條被降解，另一條則成為 20-23nt 的 mature microRNA，成熟的 miRNA 序列可在 miRBase 數據庫中查詢到，如視頻仁中顯示 dsRNA 變為成熟 miRNA 的過程。
miRNA 成熟過程中的關鍵性酶和蛋白
RNA polymerase II：一般認為 miRNA 基因由 RNA polymerase II 轉錄而來?？蓪?miRNA 基因轉錄成 5'端蓋帽 m7G 和 3‘端加尾 polyA 結構。
Drosha：Drosha 蛋白為 RNase III enzyme 家族中的成員之一，主要作用就是剪切 Pri-miRNA 成為具有 3‘ 端 2nt 懸垂的 pre-miRNA。
DGCR8：是第一個被鑒定出來的參與了體內 miRNA 加工過程的 Pasha 蛋白，參與了 Drosha 蛋白對底物的識別。 Exportin5：為核轉運受體家族的一個成員，其作用過程通過核孔復合體進行。Exp5 與 RanGTP 以及 Pre-miRNA 形成一個三聚體，通過細胞核孔運輸到胞漿，Ran-GTP 則變為 Ran-GDP，從而釋放出 Pre-miRNA。Ran-GTP 屬于核轉運受體家族的輔助因子。
Dicer 酶：屬于 RNase 超家族的第三類酶，經典的 DCR 結構域包括 N 端的 DExH RNA 解旋酶 /ATP 酶結構域，PAZ 結構域和兩個相鄰的 RNaseIII 樣結構域以及一個 dsRNA 結合結構域。
Dicer 酶是成熟的 miRNA 產生所必須的，可以剪切 pre-miRNA5'端臂，也可以剪切 3‘ 端臂，或者同時剪切兩條臂。
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